Начало >> Статьи >> Архивы >> Авторадиография

Фиксирование эмульсии - Авторадиография

Оглавление
Авторадиография
Области применения авторадиографии
Радиоактивные изотопы
Авторадиография в сравнении с другими методами обнаружения ионизирующих излучений
Ядерные фотоэмульсии и фотографический процесс
Кристаллы бромистого серебра
Желатин
Скрытое изображение
Проявление скрытого изображения
Физическое проявление
Фиксирование эмульсии
Специальные методики
Цветные эмульсии
Воздействие ионизирующего излучения на ядерные эмульсии
Бета-частицы
Другие виды ионизирующего излучения
Разрешающая способность авторадиографии
Факторы, определяющие разрешающую способность зернистых авторадиограмм
Разрешение в электронномикроскопической авторадиографии
Разрешающая способность трековых авторадиограмм
Эффективность авторадиографии
Эффективность при электронномикроскопической авторадиографии
Эффективность трековой авторадиографии
Эффективность макроскопической авторадиографии
Соотношение между факторами, определяющими разрешение и эффективность
Фон авторадиограмм
Хемография
Облучение внешними источниками
Уничтожение фона
Измерение фона
Микроскопия и микрофотография авторадиограмм
Оптическая система для освещения в темном поле
Микрофотография зернистых авторадиограмм
Исследование в темном поле
Исследование и фотографирование трековых авторадиограмм
Относительные измерения радиоактивности
Перекрестные эффекты
Факторы связанные с эмульсией и влияющие на относительные измерения
Относительные измерения в трековой авторадиографии
Счет зерен и треков
Фотометрическая оценка плотности зерен
Выбор визуального или фотометрического метода счета зерен
Необходимость абсолютных измерений
Абсолютные измерения радиоактивности с помощью трековой авторадиографии
Планирование и осуществление авторадиографических исследований
Выбор эмульсии
Эксперименты с двумя изотопами
Освоение новой методики
Контрольные процедуры, необходимые для каждого эксперимента
Проектирование и оборудование темной комнаты
Гистологическая техника и авторадиография
Выбор способа гистологической фиксации
Методика приготовления гистологических срезов
Непроницаемые пленки
Приготовление авторадиограмм для микроскопии
Авторадиография растворимых радиоизотопов
Способы авторадиографии растворимого материала
Хемография и артефакты от давления
Количественные исследовани растворимых радиоактивных изотопов
Методика съемной эмульсии
Недостатки методики съемной эмульсии
Подробное описание методики  съемной эмульсии
Методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Факторы, влияющие на толщину эмульсионного слоя
Выбор подходящей толщины эмульсии
Оценка и описание методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Методика жидкой эмульсии для трековой авторадиографии
Авторадиография с электронной микроскопией
Ограничения современных методик
Детальное описание методик
Авторадиография макроскопических объектов
Авторадиография  в макроскопических образцах
Описание методик авторадиографии макроскопических объектов
Послесловие

Фиксирование эмульсии, следующее за ее химическим проявлением, состоит в растворении оставшихся кристаллов бромистого серебра. Его обычно осуществляют, помещая эмульсию в раствор гипосульфита натрия. Ионы гипосульфита натрия образуют серию комплексных соединений с серебром, которые ускоряют процесс растворения кристаллов.
Можно увеличить скорость фиксирования путем покачивания кюветы с раствором, а также повысив температуру последнего. Окончанием процесса фиксирования обычно считают удвоенное время просветления эмульсии.
Концентрация гипосульфита натрия должна составлять 25— 35%. Обычно работают с 30%-ным раствором, однако нет необходимости во взвешивании гипосульфита с точностью до третьего знака.
Важно помнить, что ядерные эмульсии содержат более высокий процент бромистого серебра, чем фотоэмульсии, и что скорость фиксирования резко падает с накоплением в растворе продуктов фиксирования. Можно ориентировочно считать, что 250 мл раствора гипосульфита натрия необходимы для фиксирования 24 авторадиограмм с тонкими слоями эмульсии на пластинках размером 75X25 мм. Для более толстых слоев требуются большие объемы и более частые смены раствора гипосульфита натрия. Фактором, ограничивающим скорость фиксирования, является, по-видимому, диффузия комплексов серебра и гипосульфита натрия из эмульсии.
В фотографии часто применяют быстрые фиксажи. В состав быстрых фиксажей обычно входит бисульфит аммония и они сокращают время фиксирования на 75%. К сожалению, бисульфит аммония не только быстро растворяет кристаллы бромистого серебра, но и медленно воздействует на зерна серебра. Для очень тонких эмульсионных слоев его можно использовать, так как вследствие малого времени контакта проявленные зерна пострадают незначительно. Однако в более толстых слоях, когда время фиксирования может быть очень продолжительным и требуется ускорение этого процесса, зерна серебра могут при использовании быстрого фиксажа настолько уменьшиться в размере, что станут невидимыми.
В кислые фиксажи можно добавлять дубители. Они уменьшают набухание желатина при последующем промывании и, следовательно, опасность механического повреждения. Однако применение дубителей усложняет процесс фиксирования и, в частности, может значительно увеличить его продолжительность в случае толстых эмульсионных слоев. Во многих микроскопических работах можно избежать физического повреждения эмульсии во время промывания, после чего ее следует накрыть покровным стеклом. Поэтому дубители следует применять при получении авторадиограмм крупных объектов, таких, как хроматограммы.
Очевидно, в ядерной эмульсии, содержащей обычно по объему 50% кристаллов бромистого серебра, из которых лишь небольшая часть превращается в зерна серебра, удаление непроявленных зерен при фиксировании будет значительно уменьшать объем эмульсии. После фиксирования и сушки толщина эмульсионного слоя составляет около 1/5—1/3 первоначальной толщины слоя эмульсии во время экспозиции. Это обстоятельство сильно затрудняет распознавание и прослеживание треков частиц в толстых слоях эмульсии, поэтому эмульсию часто пропитывают глицерином или каким-либо подобным соединением для восстановления ее толщины до приблизительно первоначального уровня.
Зерна бромистого серебра, оставшиеся неизмененными в процессе проявления, переходят при фиксировании в раствор. Впоследствии продукты фиксирования должны быть удалены из эмульсионного слоя проточной водой. Применение плоской неглубокой кюветы и проточной воды обеспечивает наименьшее время промывки. Во время этой операции желатин обычно разбухает, и требуются особые меры предосторожности, чтобы не повредить или не переместить эмульсию. Если эмульсионный слой очень тонок, например в электронномикроскопической авторадиографии, или не слишком прочно сцеплен, как это бывает при герметизации образца с помощью пленки из поливинилхлорида, промывание следует проводить крайне осторожно. Этого можно достичь, установив образцы во время промывания горизонтально или промывая в нескольких сменах неподвижной воды.
Хорошее качество авторадиограмм достигается, если температура всех растворов, используемых при их обработке, поддерживается примерно одинаковой, предпочтительно 20° С или ниже.



 
« Автоматизированный мониторинг больных сахарным диабетом детей и подростков   Актуальные проблемы низкорослости у детей »