Начало >> Статьи >> Архивы >> Авторадиография

Выбор визуального или фотометрического метода счета зерен - Авторадиография

Оглавление
Авторадиография
Области применения авторадиографии
Радиоактивные изотопы
Авторадиография в сравнении с другими методами обнаружения ионизирующих излучений
Ядерные фотоэмульсии и фотографический процесс
Кристаллы бромистого серебра
Желатин
Скрытое изображение
Проявление скрытого изображения
Физическое проявление
Фиксирование эмульсии
Специальные методики
Цветные эмульсии
Воздействие ионизирующего излучения на ядерные эмульсии
Бета-частицы
Другие виды ионизирующего излучения
Разрешающая способность авторадиографии
Факторы, определяющие разрешающую способность зернистых авторадиограмм
Разрешение в электронномикроскопической авторадиографии
Разрешающая способность трековых авторадиограмм
Эффективность авторадиографии
Эффективность при электронномикроскопической авторадиографии
Эффективность трековой авторадиографии
Эффективность макроскопической авторадиографии
Соотношение между факторами, определяющими разрешение и эффективность
Фон авторадиограмм
Хемография
Облучение внешними источниками
Уничтожение фона
Измерение фона
Микроскопия и микрофотография авторадиограмм
Оптическая система для освещения в темном поле
Микрофотография зернистых авторадиограмм
Исследование в темном поле
Исследование и фотографирование трековых авторадиограмм
Относительные измерения радиоактивности
Перекрестные эффекты
Факторы связанные с эмульсией и влияющие на относительные измерения
Относительные измерения в трековой авторадиографии
Счет зерен и треков
Фотометрическая оценка плотности зерен
Выбор визуального или фотометрического метода счета зерен
Необходимость абсолютных измерений
Абсолютные измерения радиоактивности с помощью трековой авторадиографии
Планирование и осуществление авторадиографических исследований
Выбор эмульсии
Эксперименты с двумя изотопами
Освоение новой методики
Контрольные процедуры, необходимые для каждого эксперимента
Проектирование и оборудование темной комнаты
Гистологическая техника и авторадиография
Выбор способа гистологической фиксации
Методика приготовления гистологических срезов
Непроницаемые пленки
Приготовление авторадиограмм для микроскопии
Авторадиография растворимых радиоизотопов
Способы авторадиографии растворимого материала
Хемография и артефакты от давления
Количественные исследовани растворимых радиоактивных изотопов
Методика съемной эмульсии
Недостатки методики съемной эмульсии
Подробное описание методики  съемной эмульсии
Методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Факторы, влияющие на толщину эмульсионного слоя
Выбор подходящей толщины эмульсии
Оценка и описание методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Методика жидкой эмульсии для трековой авторадиографии
Авторадиография с электронной микроскопией
Ограничения современных методик
Детальное описание методик
Авторадиография макроскопических объектов
Авторадиография  в макроскопических образцах
Описание методик авторадиографии макроскопических объектов
Послесловие

Возвращаясь еще раз к характеристике идеального счетчика зерен, данной Пелком [11], интересно проследить выполнение предъявленных требований в описанном нами фотометрическом приборе.
Скорость счета достаточно велика. Исследователь может наблюдать и выделять поле для измерения. Окраска среза не влияет на результаты фотометрирования. Чувствительность прибора контролируема и достаточна для регистрации единичного зерна серебра. Воспроизводимость результатов выше 2%, а точность не хуже 10%. Прибор способен регистрировать зерна серебра, содержащиеся на всех уровнях в эмульсии, если различия в фокальных плоскостях, на которых они могут располагаться, находятся в приемлемых пределах. Диаметр круглого участка измерения может при желании изменяться. Фотометрический счетчик не очень дорог и достаточно несложен, что обеспечивает простоту и надежность его работы. При тщательном приготовлении соответствующего авторадиографического материала и контроле работы фотометра подобный прибор способен удовлетворить все приемлемые требования биолога. Предполагает ли это необходимость полной замены визуального подсчета зерен?
Очевидно, существуют некоторые задачи, которые с помощью фотометра решаются лучше, чем без него. Скорость сравнения радиоактивности над большим числом источников заметно увеличивается, и, таким образом, подсчет зерен не является более ограничивающим моментом в авторадиографии. Но все еще остается ряд ситуаций, в которых преимущества визуального подсчета зерен очевидны.
Ранее подчеркивалось, что очень низкие плотности зерен часто можно так же быстро сосчитать глазом, как и прибором, при этом в первом случае измерения более точны. Если измеряемый участок имеет неправильную форму, также предпочтителен визуальный подсчет. При наличии на авторадиограмме многочисленных крошечных зерен фона, видимых при освещении в темном поле, их необходимо дискриминировать, используя освещение в светлом поле и визуальный подсчет. Если абсолютное число зерен серебра над исследуемыми структурами предпочтительнее результата в относительных единицах, отражающих плотность зерен, визуальный подсчет может быть удобнее, чем построение калибровочной зависимости фотометрических показаний от числа зерен.

И в заключение, если использовалась методика окраски, вызывающая рассеяние света от самого образца, например, такая, как некоторые гистохимические методики определения ферментов с образованием осадка, то проведение фотометрических измерений невозможно, и подсчет зерен должен быть визуальным.
Визуальный подсчет зерен еще долгое время будет неотъемлемой частью авторадиографии. Но те лаборатории, в которых авторадиограммы приготавливают более или менее систематически, по моему мнению, значительно выиграют, дополнив визуальный подсчет фотометрическими измерениями, подобными описанным. Тогда проблема подсчета зерен перестанет быть определяющей в широком диапазоне экспериментов.



 
« Автоматизированный мониторинг больных сахарным диабетом детей и подростков   Актуальные проблемы низкорослости у детей »