Выбор способа гистологической фиксации - Авторадиография

В процессе фиксации происходит преципитация многих протеинов в тканях и клетках, что ограничивает их потерю при последующей обработке растворами и значительно улучшает вид и способность срезов к окраске. Иногда возникает предположение, что сама фиксация сопровождается потерей или перераспределением радиоактивного материала. В этом случае следует нарезать на криостате также свежезамороженный материал с помощью методики, описанной в следующей главе. Гистологическую фиксацию можно проводить в конце экспозиции, непосредственно перед проявлением.
Следует избегать некоторых фиксаторов, так как после их воздействия ткани имеют тенденцию взаимодействовать с эмульсией, вызывая хемографию. Такими являются фиксаторы, содержащие соли ртути и свинца, и жидкость Ценкера [5]. Для авторадиографии часто используют формалин, но он оказывает десенсибилизирующее действие на эмульсию (см. например, рис. 21, где показано выраженное снижение интенсивности скрытого изображения при авторадиографии ткани, фиксированной формалином). В некоторых случаях исходный эффект наблюдают после применения глютарового альдегида. Можно использовать фиксаторы, содержащие пикриновую кислоту, такие, как раствор Буэна. Получающееся вследствие применения пикриновой кислоты желтое окрашивание удаляют в процессе обезвоживания срезов, обрабатывая их аммиачным спиртом или раствором карбоната лития.
Наиболее надежные фиксаторы —жидкость Карнуа и абсолютный метиловый спирт. В ряде исследований было показано, что эти фиксаторы не оказывают влияния на эмульсию [5, 6]. Однако они могут не обеспечивать достаточно хорошего сохранения специфических структур. При использовании других фиксаторов возможность появления позитивной или негативной хемографии можно уменьшить длительным промыванием ткани в водопроводной воде для удаления избытка фиксатора. Чтобы выявить возможность появления хемографии и избежать затруднений при исследовании радиоактивного материала, необходимо предварительно исследовать срезы из материала, не содержащего радиоактивности и фиксированного в выбранном фиксаторе. Если для удовлетворительного сохранения специфических структур необходимы особые способы фиксации, которые вызывают хемографию, срезы после окрашивания и до покрытия эмульсией можно изолировать непроницаемой пленкой, например поливинилхлоридной.