Начало >> Статьи >> Архивы >> Авторадиография

Количественные исследовани растворимых радиоактивных изотопов - Авторадиография

Оглавление
Авторадиография
Области применения авторадиографии
Радиоактивные изотопы
Авторадиография в сравнении с другими методами обнаружения ионизирующих излучений
Ядерные фотоэмульсии и фотографический процесс
Кристаллы бромистого серебра
Желатин
Скрытое изображение
Проявление скрытого изображения
Физическое проявление
Фиксирование эмульсии
Специальные методики
Цветные эмульсии
Воздействие ионизирующего излучения на ядерные эмульсии
Бета-частицы
Другие виды ионизирующего излучения
Разрешающая способность авторадиографии
Факторы, определяющие разрешающую способность зернистых авторадиограмм
Разрешение в электронномикроскопической авторадиографии
Разрешающая способность трековых авторадиограмм
Эффективность авторадиографии
Эффективность при электронномикроскопической авторадиографии
Эффективность трековой авторадиографии
Эффективность макроскопической авторадиографии
Соотношение между факторами, определяющими разрешение и эффективность
Фон авторадиограмм
Хемография
Облучение внешними источниками
Уничтожение фона
Измерение фона
Микроскопия и микрофотография авторадиограмм
Оптическая система для освещения в темном поле
Микрофотография зернистых авторадиограмм
Исследование в темном поле
Исследование и фотографирование трековых авторадиограмм
Относительные измерения радиоактивности
Перекрестные эффекты
Факторы связанные с эмульсией и влияющие на относительные измерения
Относительные измерения в трековой авторадиографии
Счет зерен и треков
Фотометрическая оценка плотности зерен
Выбор визуального или фотометрического метода счета зерен
Необходимость абсолютных измерений
Абсолютные измерения радиоактивности с помощью трековой авторадиографии
Планирование и осуществление авторадиографических исследований
Выбор эмульсии
Эксперименты с двумя изотопами
Освоение новой методики
Контрольные процедуры, необходимые для каждого эксперимента
Проектирование и оборудование темной комнаты
Гистологическая техника и авторадиография
Выбор способа гистологической фиксации
Методика приготовления гистологических срезов
Непроницаемые пленки
Приготовление авторадиограмм для микроскопии
Авторадиография растворимых радиоизотопов
Способы авторадиографии растворимого материала
Хемография и артефакты от давления
Количественные исследовани растворимых радиоактивных изотопов
Методика съемной эмульсии
Недостатки методики съемной эмульсии
Подробное описание методики  съемной эмульсии
Методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Факторы, влияющие на толщину эмульсионного слоя
Выбор подходящей толщины эмульсии
Оценка и описание методики жидкой эмульсии для авторадиографии с оценкой плотности зерен
Методика жидкой эмульсии для трековой авторадиографии
Авторадиография с электронной микроскопией
Ограничения современных методик
Детальное описание методик
Авторадиография макроскопических объектов
Авторадиография  в макроскопических образцах
Описание методик авторадиографии макроскопических объектов
Послесловие

Разрешение, которое достигается при работе с растворимыми соединениями, меченными тритием, в описанных методиках авторадиографии столь же хорошее, как и получаемое в результате использования общепринятых методик для прочно фиксированных радиоактивных соединении. По крайней мере оно дает возможность локализовать метку в отдельных клетках без значительного распространения радиоактивности в соседние клетки или тканевые пространства и даже выявить, какая часть клетки метится наиболее интенсивно (рис. 50, 51).

Рис. 50. Микрофотография криостатного среза почки мыши через 24 ч после введения Н3-мета- трексата (Х400).
Это соединение хорошо связывается с легко растворимым энзимом — редуктазой фолиевой кислоты. Видна высокая концентрация соединения в проксимальных отделах извитых канальцев, преимущественно в дистальной части цитоплазмы. Клубочек (справа) и дистальные отделы канальцев метки не содержат. Авторадиограмма приготовлена с помощью методики Апплетона для исследования растворимых изотопов с использованием съемной эмульсин Kodak AR-10. Срез окрашен гематоксилином Гарриса.
Можно ли с уверенностью использовать подобного рода материал для количественного сравнения радиоактивности разных клеток и тканей?
Нет никаких оснований отказываться от этого в отношении авторадиограмм, которые дают согласующееся, хорошо локализованное распределение зерен серебра. Сильно меченные клетки необходимо оценивать критически, чтобы определить, нет ли скопления радиоактивности в тканевых пространствах вокруг клеток или по краю среза. Если нет распространения метки, вполне оправдано использование материала для количественных работ.
В случае применения Н3 или I125 авторадиограмма будет образована отдельными зернами серебра, и их плотность будет хорошо отражать концентрацию радиоактивного материала в верхних 1—2 мкм среза, так как эти два изотопа излучают частицы низкой энергии.

В этом случае особенно важно отличить участки высокой активности от участков позитивной хемографин и артефактов от давления, а участки низкой активности — от участков негативной хемографии.

Рис. 51. Авторадиограмма эпителия матки крысы через 2 ч после введения I125 (X 7 00).
Не составляет труда сочетать методики трековой авторадиографии с методиками, используемыми для растворимых изотопов [14]. Срез можно снять с ножа криостата на толстый эмульсионный слой так же легко, как и на тонкий. В случае С14 и изотопов с более высокой энергией изучение треков авторадиограмм обеспечивает четкое различение между радиоактивностью, которая вызывает образование в эмульсин характерных треков частиц, и хемографией и артефактами от давления, которые образуют отдельные зерна серебра в ближайших к срезу слоях эмульсии.
Однако для изотопов высоких энергий колебания толщины разных частей среза и, что более вероятно, разных срезов могут вызвать серьезные погрешности в количественной авторадиографии материала, нарезанного на криостате.
Животное подвергали овариоэктомии, после чего вводили прогестерон, вызывающий концентрацию иона иода в просвете матки и эпителиальных клетках. Криостатный срез. Авторадиография с эмульсией Ilford К2 по модифицированной методике Липстона.
Результаты, полученные при использовании одного и того же соединения, меченного Н3 и С14, с учетом ошибок вследствие хемографии в первом случае и вариабельности толщины срезов во втором случае в основном согласуются [14].



 
« Автоматизированный мониторинг больных сахарным диабетом детей и подростков   Актуальные проблемы низкорослости у детей »