Начало >> Статьи >> Архивы >> Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация

Методы стандартизации жидких спиртосодержащих фитопрепаратов - Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация

Оглавление
Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация
Введение
Фармакологическая активность и применение в медицинской практике
Лекарственное растительное сырье, используемое для приготовления
Теоретические основы процесса экстрагирования
Факторы, влияющие на процесс экстрагирования
Приготовление экстрагентов
Технологические свойства измельченного растительного материала
Методы экстрагирования и используемое оборудование
Непрерывные метопы экстракции
Интенсивные методы экстракции
Очистка извлечений
Общая характеристика современных физико-химических методов анализа и стандартизации
Спектроскопия в УФ и видимой областях спектра
Планарная хроматография
Газовая хроматография
Хромато-масс-спектрометрия
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Капиллярный электрофорез
Физико-химические методы стандартизации
Методы стандартизации жидких спиртосодержащих фитопрепаратов
Характеристика разделов Подлинность и Количественное определение» нормативной документации
Развитие методов стандартизации эликсиров и бальзамов
Способы подготовки проб
Техника выполнения аналитических определении и способы интерпретации результатов
Газовая хроматография и хромато-масс-спектрометрия
Проекты общих фармакопейных статей
Проект общей фармакопейной статьи Эликсиры
Стандартные образцы и их применение для оценки качества лекарственных средств
Применение стандартных образцов при оценке качества
Анализ производства настоек, экстрактов, эликсиров
Слисок литературы

Глава 5
СТАНДАРТИЗАЦИЯ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ЖИДКИХ СПИРТОСОДЕРЖАЩИХ ФИТОПРЕПАРАТОВ В РАМКАХ ФАРМАКОПЕЙНЫХ НОРМАТИВОВ РОССИИ
ВАЖНЕЙШИЕ МЕТОДЫ СТАНДАРТИЗАЦИИ ЖИДКИХ СПИРТОСОДЕРЖАЩИХ ФИТОПРЕПАРАТОВ
Препараты на основе растительного сырья составляют около 40 % номенклатуры лекарственных средств, выпускаемых в нашей стране. В свою очередь, среди них одно из ведущих мест занимают жидкие спиртосодержащие фитопрепараты: настойки, экстракты, эликсиры и некоторые родственные лекарственные формы. Опыт стандартизации этих лекарственных средств, накопленный за тридцатилетний период - 1970-1999 гг., отражен более чем в 90 фармакопейных документах, рассмотренных и утвержденных Фармакопейным комитетом (таблица 12).

Таблица 12
Количество нормативных фармакопейных документов на жидкие спиртосодержащие фитопрепараты в период 1970-1999 гг.


Лекарственная
форма

1970-1979

1980-1989

1990-1999

Всего

вфс

фс

ВФС

ФС

ВФС

ФС

Настойки

3

11

2

3

7

13

45

Экстракты

-

1

7

7

3

9

27

Капли

-

3

-

5

-

-

В

Бальзамы и эликсиры

-

-

-

9

2

11

Итого

 

 

 

 

 

 

91

К жидким спиртосодержащим фитопрепаратам относятся настойки, жидкие экстракты и их разновидности, а частности капли и получившие в последнее десятилетие второе рождение эликсиры и бальзамы (перечень соответствующих ВФС и ФС приведен в Приложении № 3 к настоящему изданию). В действующей (государственной фармакопее XI изд. (ΙΦ XI) содержатся общие статьи «Настойки» и «Экстракты».
В России издавна сложилась традиция приготовления настоек и жидких экстрактов из одного вида лекарственного растительного сырья (моносырьевой состав). Позже стала развиваться тенденция использования смеси нескольких видов [от 3 до 5 компонентов] лекарственного растительного сырья (олигосырьевой состав). Например, жидкий экстракт «Ротокан» готовят из смеси трех сырьевых компонентов, «Простанорм» — из четырех, настойку горькую — из пяти. В последнее время число сырьевых компонентов продолжает возрастать: например, настойку «Кристина» готовят из двенадцати сырьевых компонентов.
Бальзамы и эликсиры получают, как правило, из смеси значительно большего числа сырьевых компонентов (полисырьевой состав}. В большинстве случаев их число превышает 20: например, в эликсире «Алтайский» — 24, бальзаме «Виватон» — 26 и т. д. Однако в отдельных случаях оно может быть и небольшим: в грудном эликсире — 2, а бальзаме «Московия» — 3.
Специфика эликсиров и бальзамов заключается также и в том, что в состав сырья вводятся пищевые (яблочный сок, мед, кедровые орехи и др.) и пряные (корневища имбиря, семена кардамона и др.) компоненты. Можно отметить, что в этой группе препаратов используют два названия «Эликсиры» и «Бальзамы». Тем не менее на примере известных в настоящее время препаратов не удается выявить существенных различии, позволяющих разграничить эти две разновидности, поэтому они рассматриваются в одной группе.
Капли получают путем смешивания в определенных соотношениях готовых настоек. Для их приготовления смешивают две, три, реже четыре моносырьевых настойки и иногда добавляют неорганические (например, бромид натрия), или синтетические, или природные органические (например, ментол) соединения. Доминирующей настойкой, чаще всего входящей в состав капель, является настойка валерианы. Она используется в шести из восьми известных рецептур.
На протяжении рассматриваемого 30-летнего периода перечень нормируемых показателей качества препаратов находился в динамическом развитии: появлялись новые показатели, изменялось содержание уже имеющихся. До последнего времени комплекс показателей, с помощью которых может быть достоверно проконтролировано качество лекарственного средства, определялся ОСТ 42-506-96 «Порядок разработки, согласования и утверждения нормативной документации на лекарственное средство и лекарственное растительное сырье», а с 1 марта 2000 г.— ОСТ 91500.05.001-00 «Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения».
Для лекарственных форм настоек и экстрактов обязательными являются следующие показатели: описание, подлинность, тяжелые металлы, содержание спирта, или плотность, сухой остаток, количественное определение и микробиологическая чистота. Поскольку в общей статье «Настойки» в ГФ XI нет дифференциации этой лекарственной формы на отдельные разновидности (капли, эликсиры и др.), то разработчики подобных препаратов, как правило, придерживались общих требований к настойкам.
Описание. Общепринятым показателем, содержащимся во всех документах, является показатель «Описание». Как правило, препараты этого типа представляют собой прозрачные жидкости бурого, красно-коричневого или коричневого цвета, в большинстве случаев с характерным запахом. Для некоторых препаратов отмечается специфический вкус и допускается помутнение или выпадение осадка в процессе хранения. В ходе контроля часто возникают затруднения в определении оттенков цвета, и поэтому актуальным вопросом является разработка методик адекватного определения цветности с помощью объективных способов анализа.
Подлинность. Этот показатель также является общепринятым. В раннем периоде выпуска спиртосодержащих фитопрепаратов (1970-1985 гг.) для подтверждения подлинности использовали только качественные реакции на различные группы соединений. В таблице 13 представлены некоторые наиболее широко используемые тесты. Несмотря на то что эти тесты и до сих пор часто включают в фармакопейную документацию, их информативность для подтверждения подлинности препарата невелика. Большей избирательностью обладают те качественные реакции, которые применяются для обнаружения индивидуальных веществ-маркеров, подтверждающих наличие в сырье определенных растительных источников. Так. например, обнаружение глицирризиновой кислоты в препарате эликсир «Грудной» свидетельствует о наличии в сырье корня солодки. В препарате эликсир «Виватон» обнаружение инулина соответствует наличию в исходном сырье корней одуванчика, а также корневищ и корней девясила.
В связи со все более широким применением хроматографических и спектральных методов для стандартизации лекарственных препаратов появилась реальная возможность повышения надежности доказательства подлинности препаратов. Именно физико-химические методы позволили перейти от обнаружения групп веществ к обнаружению индивидуальных компонентов.

Таблица 13
Некоторые качественные реакции на различные группы биологически активных веществ в составе жидких спиртосодержащих фитопрепаратов


Группа обнаруживаемых веществ

Используемые реактивы

Наблюдаемый
результат

Апкапоипы

Кремневольфрамовая
кислота

Осадок

Ароматические
альдегиды

Барбитуровая или 2-тио- барбитуровая кислота

Желтое окрашивание

Аминокислоты

Нингидрин, ацетат натрия

Сиреневое окрашивание

Дубильные вещества

Ацетат свинца
Железоаммониевые
квасцы
Хлорид железа (ΙΙI)

Желто-коричневый осадок, растворимый в кислотах
Темно-зеленое окрашивание
Темно-фиолетовое
окрашивание

Полисахариды

Спирт этиловый

Осадок

Восстанавливающие
сахара

Реактив Фелинга

Коричнево-красный
осадок

Сердечные гликозиды

2,4-Динитрофенипсупьфон, гидроксид натрия Пикрат натрия

Синее окрашивание
Оранжево-желтое
окрашивание

Сапонины

Вода или разбавленная соляная кислота

Стойкая пена

Терпеноиды

n-Диметипаминобензальдегид. серная кислота (конц.] Формалин, серная кислота (конц.)
Ванилин, серная кислота (конц.]

Коричнево-бурое
кольцо
Красно-бурое кольцо
Фиолетово-коричневое
окрашивание

Флавоноиды

Магний или цинк, соляная кислота (конц.]

Розово-малиновое
окрашивание

Фенолы

n-Нитрофенилдиазонин
хлорид
Хлорид железа (III)

Желто-оранжевое окрашивание Зеленовато-фиолетовое окрашивание

Первым шагом в этом направлении овилась внедрение тонкослойной (планарной) хроматографии (ТСХ) с целью обнаружение индивидуальных соединений по значениям R, сравниваемым с имеющимися литературными или ранее полученными экспериментальными данными. В этом методе существует весьма эффективный экспериментальный прием, основанный на использовании веществ- свидетелей, в качестве которых в последнее время стараются применять государственные стандартные образцы. С помощью метода ТСХ часто определяют наличие флавоноидных соединений при использовании стандартных образцов рутина, кверцетина, гиперозида, лютеолина; наличие терпеноидов в сравнении со стандартными образцами ментола, эвгенола, тимола, камфоры и др.
Неоспоримые преимущества имеет стандартизация спиртосодержащих фитопрепаратов с помощью современных инструментальных хроматографических методов (газовой (ГЖХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Однако эти методы еще не нашли должного применения в стандартизации жидких спиртосодержащих фитопрепаратов. Так, метод ГЖХ не был использован ни в одном из документов на настойки, а метод ВЭЖХ — только в ВФС на настойку «Кристина» для обнаружения индивидуальных соединений [влантон, сирингин]. Наиболее «насыщенными» по критерию использования физико-химических методов оказываются бальзамы и эликсиры. Многие документы содержат методики, предусматривающие применение нескольких инструментальных методов (эликсиры «Алтайский», «Амрита», «Эвалар» и др.).
С поликомпонентностью сырьевого состава эликсиров и бальзамов связаны трудности выбора биологически активных соединений, позволяющих репрезентативно стандартизовать препарат. Решение этой проблемы невозможно без сравнительного изучения химического состава препарата и его сырьевых источников. Применение хромато-масс-спектрометрического анализа и ВЭЖХ с диодно-матричным детектированием позволяет идентифицировать в составе препаратов многочисленные индивидуальные соединения, часть из которых может быть отнесена к приоритетным и специфическим маркерам.
Впервые классификация экстрактивных веществ с использованием этих понятий была предложена проф. И. А. Тюкавкиной и сотрудниками в работе (Тюкавкина Н. А. и др., 1999). Приоритетными маркерами предложена называть соединения, обнаруживаемые одновременно в нескольких исходных сырьевых ингредиентах, но в одном или нескольких из них содержащиеся в преобладающих количествах; специфическими маркерами — соединения, поставщиком которых является единственный сырьевой ингредиент.
Сочетание углубленного предварительного изучения компонентного состава каждого из исходных видов растительного сырья и полученного из них фитопрепарата является необходимым условием для обеспечения высокого уровня стандартизации.
Дальнейшее внедрение инструментальных физико-химических методов в нормативную документацию на настойки и жидкие экстракты является перспективной задачей, при решении которой необходимо не только более активно использовать эти методы при пересмотре уже имеющихся ВФС и ФС, но наряду с этим разрабатывать методики, позволяющие расширить перечни биологически активных соединений, определяемых с применением этих методов.
Содержание спирта этилового. Этот показатель включен практически во все документы на настойки, экстракты, бальзамы и эликсиры, в документации на капли преимущественно нормируется другой показатель (плотность).
При сравнительном рассмотрении частных статей на настойки выявлено, что содержание спирта в препаратах этой группы варьируется в широких диапазонах: для 40 % от общего числа известных настоек содержание спирта нормировано в пределах 50-70 % (настойки чаги, багульника, календулы, подорожника, полыни, валерианы, пустырника. боярышника и др.); для 35% их числа — в пределах 30-50 % (настойки софоры японской, листьев барбариса обыкновенного, зверобоя, пиона уклоняющегося и др.). для 15 % препаратов — свыше 70 % (настойки перца стручкового, чеснока, плодов лимонника и др.). В редких случаях содержание спирта не превышает 30 % — например, в настойке корневищ с корнями валерианы свежих (28 %).
Для экстрактов по сравнению с настойками характерно несколько меньшее содержание спирта. Для 20 % от общего числа экстрактов содержание спирта нормировано в пределах 10-30 % (экстракты тимьяна, алоэ, горицвета, пустырника, термопсиса), для 45% их числа — в пределах 30-50 % (экстракты календулы, ромашки, тысячелистника, валерианы, элеутерококка, родиолы и др.), для 15% экстрактов — в пределах 50-70 % (экстракты левзеи, кукурузных рылец, пастушьей сумки и др.), для 10% экстрактов — свыше 70% (экстракты травы душицы, шишек хмеля, плодов моркови дикой и др.).
Для эликсиров и бальзамов наиболее характерно содержание спирта в пределах 30-45 %.
Содержание спирта, согласно ГФ XI, определяют по температуре кипения или по плотности отгона. В настоящее время разработаны современные методики ГЖХ-анализа, позволяющие наряду со спиртом определять примеси посторонних растворителей (метанол, 2-пропанол и др.), а также другие летучие действующие вещества. Пополнение арсенала нормативной документации такими методиками — важная и перспективная задача.
Сухой остаток. С помощью этого показателя нормируется суммарное содержание экстрактивных веществ в настойках и экстрактах. Для настоек этот показатель обычно находится в пределах 1,0-4,0 %. Выпадает из общего русла по этому показателю настойка софоры японской (не менее 19 %), при получении которой используют соотношение сырья и экстрагента 1 : 2. Для экстрактов сухой остаток нормируется в широком интервале от 6 % до 21 %, но в отдельных случаях наблюдаются очень низкие значения этого показателя (например, 0,38 % в экстракте алоэ жидком). Для бальзамов и эликсиров сухой остаток объективно не отражает суммарное содержание экстрактивных веществ, поскольку в этот показатель вносят свой вклад другие пищевые добавки (сахар, мед и т. п.).
Тяжелые металлы. Содержание тяжелых металлов в спиртосодержащих фитопрепаратах нормируют в соответствии с общими статьями ГФ XI, и оно должно составлять не более 0,001 % для настоек и не более 0,01 % для экстрактов. К сожалению, многие устаревшие методики определения тяжелых металлов позволяют оценить лишь их суммарное содержание и не дают представления о содержании отдельных элементов. В связи с осложненной экологической обстановкой в ряде районов РФ необходимо специально контролировать содержание ряда наиболее опасных примесей (свинец, ртуть, стронций, кадмий, мышьяк и т. д ). Для совершенствования определения этого показателя необходимо предусмотреть разработку и включение в соответствующую нормативную документацию новых методик, основанных на спектральных методах.
Микробиологическая чистота. Этот показатель регламентируется впервые введенной в ГФ XI статьей «Методы микробиологического контроля лекарственных средств» и дополнением к ней в виде «Изменения» от 1 июня 1996 г.
Настойки, экстракты, капли, эликсиры и бальзамы относятся к категории «3д» — «Жидкие лекарственные средства из сырья растительного, животного или природного происхождения», в соответствии с которой такие препараты должны содержать не более 5 Х103 аэробных бактерий, 102 дрожжевых и плесневых грибов при отсутствии Pseudomonas aureginosa. Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella и не более 102 других кишечных бактерий.
Количественное определение в настоящее время рассматривается как один из основных нормируемых показателей. Этот раздел предусматривает описание используемых аналитических методик (в том числе с применением современных инструментальных методов) в совокупности с рекомендуемыми для них схемами подготовки проб для анализа.
В ранних работах чаще всего применяли методы фотоэлектроколориметрии, титрования и гравиметрии. Так, методом фотоэлектроколориметрии определяют сумму алкалоидов в пересчете на атропин (для всех рецептур капель, содержащих настойку беладонны); сумму терпеноидов (после взаимодействия с п-диметиламинобензальдегидом) в пересчете на ментол (капли с ментолом); сумму фенольных соединений в пересчете на рутин (экстракт травы очитка большого); сумму иридсидов в пересчете на пеонифлорин (настойка пиона уклоняющегося) или в пересчете на гарпагид ацетат (настойка пустырника); сумму капсаициноидов в пересчете на капсаицин (настойка перца стручкового).
Метод титрования довольно широко представлен в ранней документации на спиртосодержащие фитопрепараты. Титрованием щелочью определяют карбоновые кислоты (например, лимонную), фенолы (например, тимол); титрованием перманганатом калия — сумму дубильных веществ в пересчете на танин; титрованием хлороводородной кислотой — сумму алкалоидов.
Весовой метод разработан для определения алкалоидов (настойка листьев барбариса и настойка василистника вонючего), тритерпеновых гликозидов (настойка биоженьшеня), жирных и эфирных масел (настойка из плодов лимонника).
Широко применяемым в разделах количественного определения является метод УФ-спектрофотометрии. По частоте использования почти классической стала методика определения суммарного содержания флавоноидов путем измерения оптической плотности комплекса флавоноидов с хлоридом алюминия в пересчете на рутин. Например, она использована в документах на препарат «Простанорм», экстракт боярышника жидкий, настойку боярышника, настойку зверобоя бальзам «Панта-Форте», эликсир «Кедровит» и др.
УФ-спектрофотометрический метод является базовым и для определения глицирризиновой кислоты (эликсир грудной), ароматических соединений в пересчете на бензойную кислоту (эликсир «Демидовский»), сердечных гликозидов в пересчете на цимарин после получения дериватов с нитратом натрия (экстракт горицвета жидкий) и др.
В отдельных случаях для количественной оценки привлекаются биологические методы, особенно для препаратов, содержащих сердечные гликозиды, например для всех рецептур капель. В основном этот метод разработан на лягушках, за исключением методики, использованной для экстракта чистеца буквицецветного, в которой биологическая активность препарата определяется на петушках.
В документации, разработанной за последние пять лет, появились методики с использованием метода ВЭЖХ. Эти методики введены в документацию на бальзам «Московия» (определение кверцетина), эликсир «Кедровит» (определение танина), эликсир «Амрита» (определение апантона) и др. Более широкое введение таких методик
в документацию, к сожалению, сдерживается высокой стоимостью необходимого оборудования и расходных материалов.
Важным моментом обеспечения точности и воспроизводимости методик количественного определения биологически активных веществ в спиртосодержащих фитопрепаратах является оптимальная пробоподготовка с целью освобождения от мешающих анализу сопутствующих веществ, с одной стороны, и достижения необходимой степени концентрирования целевых компонентов, с другой. Методики подготовки проб обычно включают операции экстракции и реэкстракции, при необходимости — осаждение высокомолекулярных веществ и удаление растворителя различными способами (нагревание, лиофилизация и др.). Эффективным методом пробоподготовки представляется твердофазная экстракция с применением патронов с различными сорбентами. Так, патроны «Диапак» были использованы при подготовке проб для анализа методом ВЭЖХ при разработке документации на бальзам «Московия» и эликсир «Кедровит»: аналогичная операция твердофазной экстракции с применением полиамидного сорбента (для разделения фенолокислот и флавоноидов (Тюкавкина Н. А. и др., 1999).
В целом в результате рассмотрения существующей нормативной документации выявлено, что основная номенклатура настоек, экстрактов и капель (72,5 % общего числа фармстатей) не пересматривалась в течение длительного времени, поэтому не полностью удовлетворяет предъявляемым к НД современным требованиям и подлежит пересмотру производителями соответствующей продукции с включением инструментальных методов и оптимальных схем пробоподготовки. В настоящее время вопросам стандартизации жидких спиртосодержащих растительных лекарственных средств уделяется большое внимание, накопленный опыт в этой области обобщается и систематизируется (Тюкавкина Н. А. и др.. 1997; Багирова В. Л. и др., 1999; Баландина И. А. и др., 1999).
Жидкие спиртосодержащие фитопрепараты — настойки, экстракты и их разновидности (капли, эликсиры, бальзамы) — прошли апробацию практикой в течение длительного периода и зарекомендовали себя как эффективные, традиционные и широко востребованные отечественные лекарственные препараты.



 
« Наследственные факторы в формировании задержки полового развития у мальчиков   Неврологические проявления остеохондроза позвоночника »