Начало >> Статьи >> Архивы >> Основы гистологии

Окрашивание соединительной ткани азур эозином - Основы гистологии

Оглавление
Основы гистологии
Краткий очерк истории гистологии
Цитология
Клетка
Цитоплазма
Ядро
Жизнедеятельность клетки
Деление клеток
Эпителиальная ткань
Соединительная ткань
Кровь
Рыхлая неоформленная соединительная ткань
Ретикулярная ткань
Плотная волокнистая соединительная ткань
Хрящевая ткань
Костная ткань
Мышечная ткань
Нервная ткань
Нервные волокна и окончания
Сердечно-сосудистая система
Органы кроветворения
Пищеварительная система
Железы
Кожа
Выделительная система
Органы дыхания
Нервная система, органы чувств
Половая система
Организация рабочего места лаборанта-гистолога
Техника изготовления гистологических препаратов
Взятие и этикетирование материала
Задачи и правила фиксации
Фиксирующие средства
Промывание, обезвоживание гистологического материала
Пропитывание и заливка гистологического материала
Подготовка тканей для электронно-микроскопического исследования
Микротомы и работа с ними
Микротом замораживающий, охлаждающий столик
Уход за микротомом, микротом-криостат
Микротомные ножи
Ультратом
Приготовление срезов из парафиновых блоков
Приготовление целлоидиновых срезов
Окрашивание и заключение срезов
Просветление и заключение срезов, заключение в смолы
Заключение в водные среды
Методы окрашивания препаратов
Приготовление и окрашивание мазка крови для подсчета лейкоцитарной формулы
Окрашивание ткани по методу ван-Гизона, Маллори
Окрашивание соединительной ткани азур эозином
Окрашивание эластических волокон методом Унны—Тенцера, резорцин-фуксином
Выявление аргирофильных волокон, элементов нервной системы
Импрегнация по методу Бильшовского-Грос
Выявление нервных элементов методом прижизненного окрашивания метиленовым синим
Импрегнация элементов макроглии
Безынъекционный метод изучения сосудов по В. В. Куприянову
Обработка и окрашивание костной ткани, декальцинация, окрашивание
Гистохимические методы
Выявление (суммарное) белков
Выявление полисахаридов
Выявление и идентификация кислых мукополисахаридов
Комбинированные гистохимические методы (для полисахаридов и протеидов)
Окрашивание жиров и липидов, выявление железа
Гистохимия нервной системы
Гистохимия ферментов
Применение изотопов в гистологии
Приготовление пленчатых препаратов
Обработка биопсийного материала

Фиксация: ценкер-формол по Максимову; несколько худшие фиксаторы 10% формалин, жидкость Ценкера, абсолютный спирт.
Это окрашивание является одним из лучших методов выявления клеточных элементов крови и соединительной ткани.

Рабочие растворы

Первый раствор — 0,1 г эозина растворить в 100мл дистиллированной воды; второй—0,1 г азура II растворить в 100 мл дистиллированной воды. Для приготовления растворов необходима очень чистая посуда и дистиллированная вода совершенно нейтральной реакции.
Смесь растворов готовят непосредственно перед окрашиванием. Для этого в чистом химическом стакане 10 мл первого раствора добавляют к 100 мл предварительно прокипяченной и охлажденной дистиллированной воды. Воду кипятят 5—10 мин в открытой плоскодонной колбе для удаления из воды углекислоты, которая является помехой для успешного окрашивания. Если этого мало, можно прибавить к 100 мл воды 1—2 капли слабого (1:1000) водного раствора гидрокарбоната натрия. Однако щелочная реакция воды также не годится.
К полученному раствору добавляют 10 мл второго раствора. При этом посуду, где происходит смешивание растворов, необходимо слегка покачивать. Готовый раствор темно-фиолетового цвета без хлопьев. Если же после смешивания растворов появляется хлопьевидный осадок, то раствор считается непригодным. Причиной чаще всего являются нечистая посуда и дефекты приготовления дистиллированной воды.

Окрашивание

  1. Срезы из прокипяченной дистиллированной воды помещают в раствор красителя на 12—24 ч (при комнатной температуре).
  2. Тщательно промывают в воде.
  3. Дифференцируют в 96% спирте (под контролем микроскопа). При появлении красной окраски эритроцитов дифференцировку прекращают.
  4. Срезы очень быстро обезвоживают в абсолютном спирте, затем помещают в чистый ксилол и заключают в бальзам.

Если эозин окрашивает срезы слабо, нужно удлинить дифференцировку в 96% спирте. В некоторых случаях можно увеличить содержание эозина в красящем растворе, например первого раствора 16 мл, второго — 8 мл, дистиллированной воды 80 мл.
Результат. Цитоплазма клеток окрашивается в различные оттенки синего цвета. Зернистость цитоплазмы красится различно: оксифильные зерна светло-красные, базофильные—темно-синие. Ядра клеток тоже темносиние. Гемоглобин приобретает ярко-красный цвет. При накоплении гемоглобина в цитоплазме клеток окраска меняется: чем больше гемоглобина, тем ярче розовая окраска цитоплазмы клеток.



 
« Осложнения аппендэктомии   Основы практической урологии детского возраста »