Начало >> Статьи >> Архивы >> Основы гистологии

Комбинированные гистохимические методы (для полисахаридов и протеидов) - Основы гистологии

Оглавление
Основы гистологии
Краткий очерк истории гистологии
Цитология
Клетка
Цитоплазма
Ядро
Жизнедеятельность клетки
Деление клеток
Эпителиальная ткань
Соединительная ткань
Кровь
Рыхлая неоформленная соединительная ткань
Ретикулярная ткань
Плотная волокнистая соединительная ткань
Хрящевая ткань
Костная ткань
Мышечная ткань
Нервная ткань
Нервные волокна и окончания
Сердечно-сосудистая система
Органы кроветворения
Пищеварительная система
Железы
Кожа
Выделительная система
Органы дыхания
Нервная система, органы чувств
Половая система
Организация рабочего места лаборанта-гистолога
Техника изготовления гистологических препаратов
Взятие и этикетирование материала
Задачи и правила фиксации
Фиксирующие средства
Промывание, обезвоживание гистологического материала
Пропитывание и заливка гистологического материала
Подготовка тканей для электронно-микроскопического исследования
Микротомы и работа с ними
Микротом замораживающий, охлаждающий столик
Уход за микротомом, микротом-криостат
Микротомные ножи
Ультратом
Приготовление срезов из парафиновых блоков
Приготовление целлоидиновых срезов
Окрашивание и заключение срезов
Просветление и заключение срезов, заключение в смолы
Заключение в водные среды
Методы окрашивания препаратов
Приготовление и окрашивание мазка крови для подсчета лейкоцитарной формулы
Окрашивание ткани по методу ван-Гизона, Маллори
Окрашивание соединительной ткани азур эозином
Окрашивание эластических волокон методом Унны—Тенцера, резорцин-фуксином
Выявление аргирофильных волокон, элементов нервной системы
Импрегнация по методу Бильшовского-Грос
Выявление нервных элементов методом прижизненного окрашивания метиленовым синим
Импрегнация элементов макроглии
Безынъекционный метод изучения сосудов по В. В. Куприянову
Обработка и окрашивание костной ткани, декальцинация, окрашивание
Гистохимические методы
Выявление (суммарное) белков
Выявление полисахаридов
Выявление и идентификация кислых мукополисахаридов
Комбинированные гистохимические методы (для полисахаридов и протеидов)
Окрашивание жиров и липидов, выявление железа
Гистохимия нервной системы
Гистохимия ферментов
Применение изотопов в гистологии
Приготовление пленчатых препаратов
Обработка биопсийного материала

Преимущество методов — выявление на одном срезе двух различных химических компонентов белковой и полисахаридной природы.

Комбинированный метод выявления полисахаридов (по Риттеру — Олессону)

(фиксаторы формалин, 10% формалин в 90% спирте; заливка в парафин)
Представляет собой сочетание двух методов — ШИК- реакции и метода Гале, что дает возможность выявлять в одном и том же срезе кислые мукополисахариды и мукопротеиды.
Метод. 1. Срезы депарафинировать и довести до воды.

  1. Обработать по методу Гале и перед докраской ядер провести ШИК-реакцию, а затем хорошо промыть в дистиллированной воде.
  2. Обезводить, просветлить, заключить в бальзам. Результат. Кислые мукополисахариды окрашены в синий цвет, мукопротеиды — в пурпурно-красный.

Комбинированный метод выявления белков и нейтральных полисахаридов

(фиксаторы — Карнуа, 10% формалин)
Применение данного метода обеспечивает одновременное выявление в срезах белка и нейтральных полисахаридов и удачно отражает структурную и химическую организацию исследуемых микроструктур.
Сущность метода состоит в том, что краситель процион связывается с некоторыми аминокислотными остатками белка, а ШИК-реакция окрашивает нейтральные полисахариды.
Рабочие растворы
Реактив Шиффа (способ приготовления см. с. 270). Сернистая вода (способ приготовления см. с.270). Раствор перйодата: 250 мг перйодата калия растворить в 100 мл теплой дистиллированной воды.
Раствор проциона голубого (по В. Б. Иванову): 100 мг фосфатного буфера pH 5,6.
Метод окрашивания (парафиновые срезы)

  1. Довести срезы до воды.
  2. Поместить на 10 мин в перйодат калия.
  3. Промыть в двух порциях дистиллированной воды.
  4. Поместить в реактив Шиффа на 20 мин.
  5. Промыть в трех порциях сернистых вод по 3 мин в каждой.
  6. Промыть в проточной воде в течение 30 мин.
  7. Ополоснуть в дистиллированной воде и перенести в 0,1% раствор проциона на 40 мин при температуре 50°С.
  8. Ополоснуть в двух порциях дистиллированной воды.
  9. Обезводить, просветлить, заключить в бальзам. Результат. Структуры, содержащие белок, окрашиваются в ярко-синий, а углеводы — в ярко-красный цвет.


 
« Осложнения аппендэктомии   Основы педиатрии »