Начало >> Статьи >> Архивы >> Практические навыки педиатра

Цитогенетические методы исследования - Практические навыки педиатра

Оглавление
Практические навыки педиатра
Антропометрические измерения
Степень полового созревания
Схема оценки физического развития ребенка
Физикальные методы исследования ребенка
Ошупывание
Выстукивание
Выслушивание
Генеалогический метод
Экспресс-методы выявления наследственных биохимических дефектов
Цитогенетические методы исследования
Дерматоглифика
Навыки по уходу за больным ребенком
Промывание желудка, клизмы
Навыки по уходу, вскармливанию и лечению новорожденных
Вскармливание доношенного новорожденного
Навыки по выхаживанию недоношенных детей
Методика выведения новорожденного из асфиксии
Гемолитическая болезнь новорожденных и техника заменного переливания крови
Техника взятия материала для лабораторных исследований
Техника введения лекарственных веществ и жидкостей
Введение лекарственных средств через рот, прямую кишку
Ингаляции
Парентеральное введение лекарственных веществ и жидкостей
Техника применения ванн
Местные отвлекающие процедуры
Методы теплолечения
Светолечение и светопрофилактика
Ультрафиолетовое облучение (УФО)
Методы исследования нервной системы
Методы исследования вегетативной нервной системы
Инструментальные методы исследования нервной системы
Функциональные методы исследования органов дыхания
Исследование газов крови
Функциональные исследования с использованием фармакологических проб
Функциональные методы исследования сердечно-сосудистой системы
Фонокардиография, реография
Реоэнцефалография, контрастная эхокардиография, поликардиография, кардиоинтервалография
Измерение артериального давления
Клинические функциональные пробы сердечно-сосудистой системы
Определение общей физической работоспособности
Лекарственные пробы
Методы исследования органов пищеварения
Дуоденальное зондирование
Исследование функций поджелудочной железы
Исследование испражнений
Методы исследования функции печени
Исследование экскреторной и обезвреживающей функции печени
Радиоизотопное исследование и УЗИ печени
Рентгенологические методы исследования желчных путей
Методы исследования почек и органов мочевыделения
Определение белка в моче
Исследования мочевого осадка
Функциональное исследование почек
Методы определения парциальной функции нефрона
Специальные методы исследования почек
Манипуляции - мочеполовая система
Методы исследования системы крови
Исследование лейкоцитов
Исследование костного мозга
Исследование лимфатических узлов
Исследование системы гемостаза
Переливание крови
Методы исследования обмена веществ
Методы исследования КОС
Методы исследования обмена белков
Исследование углеводного обмена
Исследование липидного обмена
Методы пункции и катетеризации вен
Санация трахеобронхиального дерева
СДПД
Техника реанимации
Методы определения иммунологической реактивности
Определение специфической реактивности
Методы исследования кожных покровов и слизистых оболочек
Приложения

Из цитогенетических методов для клинической практики большое значение имеют исследования кариотипа и определение полового хроматина.
Исследование кариотипа. Кариотип изучают в культуре клеток, выращенной in vitro. Для стимуляции перехода лейкоцитов в митотическое состояние применяют фитогемагглютинин (2 капли на 8—10 см3 периферической крови, вводимой в культуру). В фазе митотической активности клеток для фиксации хромосом материал обрабатывают колхицином (в концентрации 50*10-9 М). Последующая обработка материала гипотоническим раствором вызывает набухание области ядра и способствует разбрасыванию хромосом в цитоплазме, что облегчает изучение их числа и структуры при микроскопии. Кариотип исследуется обычно в специализированной цитогенетической лаборатории.
Определение полового хроматина. Половой хроматин — это хроматиновое тельце в форме треугольника или полулуния, находящееся в ядрах разных типов клеток. Основание треугольника или полулуния чаще располагается на ядерной мембране, а вершина или выпуклость обращена к центру ядра. У лиц женского пола в клетках эпителия слизистой оболочки рта хроматин обнаруживается в 20—70 % ядер, тогда как у мужчин — от 0 до 5 %.
Считают, что половой хроматин представляет собой одну из Х-хромосом, находящуюся в относительно неактивном состоянии (тельце Барра).

Половой хроматин
Рис. 17. Половой хроматин (тельце Барра) обозначен стрелкой.
Половой хроматин легко выявляется при окраске любым из основных ядерных красителе. Его можно обнаружить в тканях организма, клетках кожи, слизистой оболочки рта, волосяных луковиц, крови и др.
Чаще всего половой хроматин определяют в клетках слизистой оболочки щеки. Для этого металлическим шпателем делают соскоб с внутренней поверхности щеки и полученный клеточный материал тонким равномерным слоем наносят на предметное стекло. Для окраски мазка используют одну каплю 1,5 или 2 % раствора уксуснокислого ацетоорсеина. Препарат накрывают покровным стеклом, осторожно фильтровальной бумагой удаляют излишек краски, и через 2—3 минут препарат готов для микроскопирования.
Для приготовления раствора красителя берут 1,5 или 1 г орсеина и растворяют в 45 мл ледяной уксусной кислоты. Раствор нагревают до появления паров и добавляют 55 мл дистиллированной воды, после чего охлаждают и фильтруют.

При отсутствии орсеина А. М. Захаров предложил использовать красители тиозиновой группы: метиленовый синий, азур 1. Для окраски 20—50 мг одного из указанных красителей растворяют в 10 мл дистиллированной воды. Окраска производится 2—3 каплями раствора.
Подсчет полового хроматина производят под микроскопом марки МБИ-3 или МБИ-6 с иммерсионными объективами. Подсчитывают не менее 100 ядер, у которых ровные контуры, гладкая оболочка и половой хроматин прилегает к ядерной оболочке (рис. 17).
Исследование полового хроматина (Х-хромосом) помогает в диагностике таких хромосомных аномалий по половым хромосомам, как синдромы Шерешевского —Тернера
(45 ХО), Клайнфельтера (47 XXY), трисомия X (47 XXX). Выявленное при исследовании число полового хроматина в ядре клетки позволяет судить о количестве Х-хромосом, которых всегда на единицу больше, чем обнаруженных телец хроматина.



 
« Практические занятия по аптечной технологии лекарств   Практическое руководство по лечению алкоголизма »