Начало >> Статьи >> Архивы >> Рак: эксперименты и гипотезы

Опухолевые ДНК-вирусы в культуре ткани - Рак: эксперименты и гипотезы

Оглавление
Рак: эксперименты и гипотезы
Онкологические исследования как часть естествознания
Биология регуляции роста
Импульс для экспериментальных исследований рака
Повседневные канцерогены
Рак половых органов
Лестница заболеваемости раком, заключение и прогноз
Изучение рака, вызываемого каменноугольной смолой
Ароматические амины
Ароматические амины становятся канцерогенами лишь в результате их метаболических превращений
Гидроксилирование о-кольца
N-гидроксилирование
Азокрасители реагируют с метионином
N-гидроксилирование
Канцерогенные ароматические амины связываются белками
Химический канцерогенез: количественные аспекты
Канцерогенез — процесс ускоренный
Многоступенчатая гипотеза химического канцерогенеза
Факторы хозяина в возникновении опухоли
Канцерогенез и правило фаз
Влияние питания, гормонов
Характер метастазирования также определяется организмом хозяина
Факторы хозяина или «стратегия выигрыша» в развитии опухолей
Халоны
Халоны могут непосредственно останавливать митоз
Халоны как репрессоры
Халоны: общий принцип
Канцерогенез и клеточные органеллы
Ядро и канцерогенез
Лизосомы
Клеточная «социология»
Изменение мембран в опухолевых клетках
Силы, связывающие клетки между собой
Нормальные клетки могут управлять опухолевыми клетками
Роль мембран в канцерогенезе
Существует ли «контактное торможение»?
Мембраны регулируют рост клеток
Митохондрии и теория рака Варбурга
Иммунология опухолей
Трансплантируемые опухоли
У каждой опухоли имеются индивидуальные антигены
Крыса способна мобилизовать защитные механизмы
Обязательно ли наличие опухолеспецифических антигенов
Химические канцерогены обладают иммунодепрессивными свойствами
Иммунотерапия
История изучения некоторых опухолевых вирусов
Фактор молока Биттнера
Полиома
Экскурс в клинику
Опухолевые ДНК-вирусы в культуре ткани
Трансформация in vitro
Вирусная ДНК ответственна за трансформацию
Опухолевый ДНК-вирус имеет лишь несколько генов
Еще раз о роли клетки
Взгляд со стороны на опухолевые РНК-вирусы
Генетика и рак
Наследственные факторы в индуцировании опухоли
Индуцирование опухолей при скрещивании видов
Мутагенная и канцерогенная активности могут быть взаимосвязаны
Мутационная гипотеза как теоретическая необходимость
ДНК и канцерогенез
Канцерогены нарушают синтез
Химические канцерогены реагируют с клеточной ДНК
Клетки могут восстанавливать дефектную ДНК
Неопластическим трансформациям легче подвергаются пролиферирующие клетки
Несколько моделей химиотерапии опухолей
Антиметаболиты в терапии опухолей
Аспарагиназа заставляет опухолевые клетки голодать
Избыток кислоты, температура
Противовирусная терапия опухолей?
Догмы индуцирования опухолей
Догма селекции
Догма изоляции
Приживление при пересадке не является критерием, определяющим опухоль
Догма необратимости
Догма репрограммированной опухолевой клетки
О теориях рака
Заключение: программа для компьютера
Морфологический толковый словарь
Послесловие

В настоящее время исследователи открывают все большее число опухолевых вирусов и опухолей, которые могут вызываться вирусами. Однако долгое время положение вирусологии в онкологии было весьма сомнительным.
Во многих случаях отсутствовали доказательства того, что опухоли действительно были вирусного характера, поскольку из многих опухолей, вызываемых вирусами, вирус «исчезал». Таким образом, доказать вирусную этиологию, пользуясь классическими критериями бактериологии, было невозможно.
Встречались трудности и чисто методического порядка: из-за длительных латентных периодов, длящихся несколько месяцев, а то и свыше года, ставить быстрые опыты было нельзя. Точные эксперименты оставались неосуществленными: многие подопытные животные по-разному реагировали на вирусные препараты, а сами препараты по своей активности существенно отличались в разных сериях. Положение дел в корне изменилось лишь тогда, когда ученые прибегли к методам культур тканей для решения стоящих перед вирусологией опухолевых проблем. «Некоторые опухолевые вирусы легко размножаются в таких культурах, что делает возможным как точную количественную оценку, так и эффективное воспроизводство вируса; иногда вирусы вызывают трансформацию нормальной клетки в клетку, имеющую свойства опухолевой. И все это удается продемонстрировать не в течение месяцев, а в течение нескольких дней!» (Хабел).
Прежде чем мы обратимся к рассмотрению поведения опухолевых ДНК-вирусов в культурах ткани, обсудим некоторые практические проблемы.

Подсчет живых вирусов с использованием теста с просветлениями

Вирусы можно подсчитывать непосредственно под электронным микроскопом, однако, поскольку при этом считают как мертвые вирусы, так и «пустые оболочки», выводы могут не соответствовать истине. Вот почему целесообразнее подсчитывать лишь активные частицы. С этой целью следует подобрать тип клеток, в которых хорошо размножается данный вирус (клетки почек обезьяны для вируса полиомиелита, клетки зародышей мыши для вируса полиомы), инокулировать эти клетки в чашки Петри и ждать образования плотного слоя клеток. Затем клетки инокулируют разведенным раствором вируса, дают возможность вирусу войти в клетки и покрывают культуру слоем агара. Описанный прием позволяет избежать беспрепятственной диффузии вирусных частиц, высвобождающихся из инфицированных клеток в результате лизиса.
Подсчет живых вирусов
ПОДСЧЕТ ВИРУСОВ ПРИ ПОМОЩИ ПРОБЫ С ПРОСВЕТЛЕНИЯМИ
ПРОДУЦИРОВАНИЕ И ТРАНСФОРМАЦИЯ

ДЕМАСКИРОВАНИЕ ПОСЛЕ СЛИЯНИЯ
ОПУХОЛЕВЫЕ ДНК-ВИРУСЫ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК
ОПУХОЛЕВЫЕ ДНК-ВИРУСЫ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК
Поэтому вирусные частицы способны инфицировать только клетки, находящиеся в непосредственном соседстве, и лишь в них размножаться. В результате отдельный вирус как бы «проедает» дырку (просветление) в слое клеток, видную невооруженным глазом. Если в растворе вируса имеется всего несколько вирионов (множественные или индивидуальные вирусные частицы), то несколько дырок, появляющихся на пластинке, не сольются в одну. В таком случае их легко подсчитать и тем самым произвести оценку числа активных вирусных частиц—«инфекционных единиц» (фиг. 39).
Описанный метод позволяет дать количественную оценку многих вирусов, проявляющих патогенность у животных: вирусов полиомиелита, аденовирусов, а также опухолевых вирусов.



 
« Рак матки   Ранний рак желудка: диагностика, лечение и предупреждение »