Начало >> Статьи >> Архивы >> Токсинобразующие микроскопические грибы

Пенициллий исландский - Токсинобразующие микроскопические грибы

Оглавление
Токсинобразующие микроскопические грибы
Морфологическая характеристика грибов
Класс фикомицеты
Класс аскомицеты
Класс базидиомицеты
Несовершенные грибы
Род пенициллий
Род аспергилл
Род стахиботрис
Порядок спородохиальные
Порядок пикнидиальные
Спорынья пурпуровая
Спорынья паспаловая
Пенициллий исландский
Пенициллий красный
Пенициллий крапивный, лимонно-желто-зеленый, зеленоватый
Аспергиллотоксикозы
Аспергиллофумигатотоксикоз
Стахиботриотоксикоз
Спородесмиотоксикоз
Дендродохиотоксикоз
Фузариотоксикозы
Фузариограминеаротоксикоз
Другие токсические микромицеты
Методы культивирования токсических микромицетов
Экология токсинобразующих грибов и меры борьбы
Литература

PeniciIlium L к. — пенициллий Пенициллиотоксикозы (Penicilliotoxicoses)
Penicillium islandicum Sop p. — пенициллий исландский Пенициллиоисландиотоксикоз (Penicillioislandiotoxicosis)
Токсичность гриба изучена японскими исследователями в связи с токсикозами, возникшими в 1954—1955 гг. в Японии от употребления риса как местного производства, так и импортированного из Испании и США.
Морока (Morooka, 1956) установил токсичность для мышей естественно пораженного зерна риса и патологические изменения, сходные с наблюдаемыми при вызываемых им заболеваниях. Отобранный наиболее токсичный штамм гриба культивировался с целью получения токсина на среде Чапека с крахмалом и кукурузным экстрактом в течение 24 дней при 27—29° С. Получено два токсических вещества: из мицелия — пигмент лютеоскирин, описанный ранее другими японскими авторами, из культуральной жидкости — токсический метаболит. Желтый пигмент содержался только в мицелии гриба и получался из него при экстрагировании сухого мицелия петролейным эфиром, затем последовательно — ацетоном, растворением в воде, хлороформом и обработкой водным раствором 2н. НС1. Полученный осадок вызывал гибель мышей при внутрибрюшинном введении в дозе 3 мг. После дальнейшей очистки пигмента токсичность в острых опытах при внутрибрюшинном введении (в дозе 70 мг/кг) вызывала гибель животных через 24 ч (ЛД50 — 47, переносимая доза — 17,5 мг/кг).
Коллектив японских исследователей, состоящий из фармакологов, патологов, химиков, фитопатологов во главе с Кобайаши, Мийаке и др. (Kobayashi et all., 1958) провел комплексное изучение токсичности зерна риса, зараженного P. islandicum, природы и биологического действия токсических метаболитов гриба.
Токсичность заплесневелого зерна риса проверялась на мышах и крысах. После скармливания животным токсического риса в течение месяца при вскрытии обнаружены циррозы печени и другие патологические изменения. Хронические опыты проводились в течение 600 дней: через 100 дней (для мышей) и 140 дней (для крыс) после начала кормления (ранняя стадия наблюдения); промежуточный срок учета производился между 100—200 днями (для мышей) и 140— 280 днями (для крыс), окончательные наблюдения — к концу опыта. Показана зависимость течения заболевания и проявления патологоанатомических признаков от дозы и длительности употребления токсического корма. Так, при скармливании животным больших доз пораженного риса (диета из 100% токсического корма или 100 мг культуры гриба в день) проявлялись острые симптомы отравления, отмечались потеря веса и быстрая гибель мышей и крыс в раннем периоде наблюдений. При употреблении средней дозы (10—30% пораженного зерна риса в диете, или 1—10 мг гриба в день) симптомы отравления выражены слабее: небольшая потеря веса, более продолжительный период выживаемости, но гибель животных отмечалась в 100% случаев во всех сроках наблюдения. При еще меньших дозах отмечались частичная потеря веса в ранней стадии и 100%-ная выживаемость.
При вскрытии животных обнаружены патологические изменения тканей и органов: острые поражения печени — при скармливании больших доз токсического риса, циррозы — при скармливании малых доз. Изучена также токсичность метаноловых экстрактов мицелия, применяемых в камелиевом масле, при подкожном и пероральном введениях.
Наиболее характерными патологическими изменениями печени авторы считают ненормальную функцию (по реакции с бромсульфталеином), ауторсию, наличие центробулярных некрозов, жировое перерождение, вакуолизацию клеток в периферических частях долек, геморрагии и др.
Токсин P. islandicum, по мнению авторов, обладает как общетоксическим, так и специфическим гепатотоксическим действием на организм. Для выделения и изучения токсических метаболитов гриб культивировался на среде Чапека. Выделено два токсических вещества: пигмент — лютеоскирин и хлорсодержащий пептид. Лютеоскирин представляет собой желтые прямоугольные кристаллы ст. пл. 278° С (с разложением). Оптическое вращение /а/ = 25—880° (0,1 % в ацетоне); адсорбция в ультрафиолетовых лучах Ямакс= 245, 275, 430 ммк; log 2! = 4,32; 4,33; 4,46. Адсорбционный спектр в инфракрасных лучах— 1623,3378 см~ . Слаботоксичен: ЛД50 при подкожном введении составляет 1,47 и 2,21 мг (на 10 г живого веса) при пероральном введении.
Второе токсическое вещество — исландитоксин (C24H31N5Cl2) — циклический пентапептид, состоящий из пяти аминокислот, из которых две (d-р-фенил-р-аминопропионовая и дихлорпролин) описаны впервые. Последовательность их расположения следующая: /-серил-/-серил-/-дихлорпролил- -|5-фенил-|5-аминопропионил-/-аминобутиловый ангидрид (Marumo, 1962). В абсолютном этаноле имеет вид белых игольчатых кристаллов с т. пл. 251—252° С (с разложением). Оптическое вращение (а) = 92,9—100° С; адсорбция в ультрафиолетовых лучах А,макс — 257 ммк; log 2 = 2,75. Адсорбционный спектр в инфракрасных лучах — 3400, 1670, 1640, 1535, 1510, 1495, 1460, 695 см~1. Проявляет остротоксическое действие: ЛД50 при подкожном введении составляет 4,75 мкгу пероральном — 65,5 мкг (на 10 г живого веса).
В опытах с изолированной тканью печени этот токсин в концентрации 4 мкг/мл резко тормозил включение глицина (меченного С14) в белковую фракцию печени. Оба токсина не оказывали заметного влияния на включение фосфора (Р32) в фосфолипидную и кислоторастворимую нуклеотидную фракции (Saburo, Macoto, Kohei, 1963).
Лютеоскирин ингибирует рост клеток печени в культуре в концентрации 0,1 мкг/мл, вызывает их гибель при введении 1 мкг/мл\ хлорсодержащий пептид — соответственно при концентрациях 1025 мкг/мл и 1015 мкг/мл.
Таблица 6
Патологические изменения печени мышей при экспериментальном пенициллиоисландиотоксикозе


Характеристика патологического действия исландиотоксина

Количест

Выжива

Доза зараженного риса, г

во случаев

емость
(дни)

средняя в день

всего

Острые поражения печени (52%)

острая атрофия

18

3—8

2—4

8—12

под острая атрофия

7

39-69

0,5—1,5

22—95

Неопределенная картина (3%)

субхроническая
атрофия

6

72—96

0,5—1,5

47—116

2

42—75

0,8—1,5

35—100

Циррозы печени

  ранняя стадия

2

49—64

3—4

153—256

(30%)

  подострая стадия

16

219—594

0,05—1,0

14—379

Диффузная атрофия печени (15%)

 

9

205—565

0,05

9—24

 

Всего

60

3—594

0,05—4

8—397

Патологические изменения печени крыс под влиянием лютеоскирина выражаются в центробулярных некрозах, жировом перерождении клеток (острые поражения), центробулярном разрушении (подострые), центробулярной пигментации, слабых перопортальных фиброзах, образовании гепатом (хронические поражения). Хлорсодержащий пептид при остром поражении вызывает патоцитологические изменения в клетках печени с дегенерацией вакуоль, наличием капель Гиалина, разрушением клеток, геморрагией, главным образом, перипортальной области, фиброзами (при подострых поражениях). Хронические поражения токсином сопровождаются циррозами и моноглобул яром (табл. 6). При электронномикроскопическом исследовании культуры клеток печени отмечены набухание митохондрий, разрушение или грануляции, иногда пикнозы, повышение плотности в связи с истечением гиалиновых капель, разрушение цитопластической мембраны и другие изменения (Mijake, Saito, 1965).



 
« Токсикология полимерных материалов   Трудности диагностики заболеваний сердечно-сосудистой системы »